一种桑树根际高效解无机磷细菌的培养方法

本发明公开了一种桑树根际高效解无机磷细菌的培养方法,该方法在相同条件下培养,将3株高效解无机磷细菌培养至稳定期后,测定菌体的生长量和菌株的解磷能力,从而筛选出最适
申请号
201610367043
申请日
2016.05.27
公开(公告)号
CN105950510A
公开(公告)日
2016.09.21
分类号
C12N1/20(2006.01)I;C12N1/02(2006.01)I;C12R1/01(2006.01)N
发明(设计)人
于翠;胡兴明;邓文;李勇;熊超;莫荣利
申请人
湖北省农业科学院经济作物研究所
代理机构
北京金智普华知识产权代理有限公司 11401
代理人
杨采良

简介

本发明公开了一种桑树根际高效解无机磷细菌的培养方法,该方法在相同条件下培养,将3株高效解无机磷细菌培养至稳定期后,测定菌体的生长量和菌株的解磷能力,从而筛选出最适pH值为6.07.5,最适装液量范围为100125mL。该优化条件的获得为高效解磷微生物的应用提供技术支撑。
 
  一种桑树根际高效解无机磷细菌的培养方法,其特征在于,包括以下步骤:步骤1:高效解磷微生物的分离:从不同施肥桑树根际土壤中分离到3株高效解无机磷细菌W1、W2、W3;步骤2:高效解无机磷细菌生长曲线的测定:3株供试菌株在牛肉膏蛋白胨琼脂平板培养基上28℃培养24h,挑取一环接种于30mL灭菌肉膏蛋白胨液体培养基中,于28℃150r/min摇床上培养12h,制备成1×108cfu/mL悬浮菌液;在250mL的三角瓶中装入100mL的磷酸三钙无机磷培养基,灭菌冷却后;每瓶分别接种1mL1108cfu/mL解无机磷细菌悬浮菌液,3次重复,于28℃150r/min摇床上培养,定时取样,利用比浊法测定菌体生长量,绘制生长曲线;步骤3:碳源、氮源的筛选:以葡萄糖、蔗糖、可溶性淀粉、甘露醇为碳源,以酵母粉、牛肉膏、尿素、NH4NO3、(NH2)SO4为氮源,在相同的条件下,将3株高效解无机磷细菌培养至稳定期后,测定菌体的生长量和菌株的解磷能力,从而筛选出最适碳源和氮源种类;步骤4:最佳pH值筛选:使用pH计调节磷酸三钙无机磷培养基的pH值为5.0~8.5,以0.5为梯度设置8个pH值点,在相同的条件下,将3株高效解无机磷细菌培养至稳定期后,测定菌体的生长量和菌株的解磷能力,从而筛选出最适pH值范围;步骤

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